據(jù)16日《細(xì)胞報(bào)告方法》雜志上發(fā)表的一項(xiàng)研究，研究人員開(kāi)發(fā)出一種CRISPR-Cas9基因編輯方法來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)蟑螂的基因編輯。這項(xiàng)被稱(chēng)為“直接親本CRISPR(DIPA-CRISPR)”的技術(shù)，可將材料注射到卵子正在發(fā)育的雌性成蟲(chóng)體內(nèi)，而不是注入胚胎本身。

“從某種意義上說(shuō)，昆蟲(chóng)研究人員已經(jīng)從將材料注射到卵子的煩惱中解脫出來(lái)了。”資深研究作者、日本京都大學(xué)大門(mén)高明稱(chēng)，“我們現(xiàn)在可更自由、更隨意地編輯昆蟲(chóng)基因組。原則上，這種方法適用于90%以上的昆蟲(chóng)物種。”

目前的昆蟲(chóng)基因編輯方法通常需要將材料顯微注射到早期胚胎中，這嚴(yán)重限制了它在許多物種中的應(yīng)用。例如，由于蟑螂獨(dú)特的生殖系統(tǒng)，過(guò)去的研究就無(wú)法實(shí)現(xiàn)對(duì)它們的基因操作。此外，昆蟲(chóng)基因編輯通常需要昂貴的設(shè)備、針對(duì)每個(gè)物種的特定實(shí)驗(yàn)裝置以及技術(shù)精湛的實(shí)驗(yàn)室人員。

為了克服這些限制，研究人員將Cas9核糖核蛋白(RNP)注射到成年雌性蟑螂的主體腔中，以在發(fā)育的卵細(xì)胞中引入可遺傳的突變。結(jié)果表明，DIPA-CRISPR基因編輯效率(被編輯個(gè)體占孵化個(gè)體總數(shù)的比例)可高達(dá)22%。在紅色面粉甲蟲(chóng)體內(nèi)，效率達(dá)到50%以上。

DIPA-CRISPR在兩個(gè)進(jìn)化距離較遠(yuǎn)的物種中的成功應(yīng)用表明了其廣泛應(yīng)用的潛力。但這種方法并不直接適用于所有昆蟲(chóng)物種，包括果蠅。此外，實(shí)驗(yàn)表明，最關(guān)鍵的參數(shù)是對(duì)成年雌性蟑螂注射的階段。因此，使用DIPA-CRISPR技術(shù)需要掌握良好的卵巢發(fā)育知識(shí)。考慮到昆蟲(chóng)的不同生活史和繁殖策略，該技術(shù)在一些物種中的應(yīng)用可能具有挑戰(zhàn)性。

盡管有局限性，但由于DIPA-CRISPR技術(shù)易于實(shí)現(xiàn)，它可將基因編輯的應(yīng)用擴(kuò)展到廣泛的昆蟲(chóng)物種。該技術(shù)只需最少的注射設(shè)備，而且僅需兩種成分——Cas9核糖核蛋白和單引導(dǎo)RNA，大大簡(jiǎn)化基因編輯程序。此外，商用的標(biāo)準(zhǔn)Cas9可用于成年昆蟲(chóng)注射，無(wú)需耗時(shí)的蛋白質(zhì)定制工程。

大門(mén)高明說(shuō)，原則上，其他節(jié)肢動(dòng)物也有可能用類(lèi)似的方法進(jìn)行基因組編輯。這包括螨蟲(chóng)和蜱蟲(chóng)等農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥害蟲(chóng)，以及蝦和螃蟹等重要漁業(yè)資源。

總編輯圈點(diǎn)

之前有一篇論文講到了對(duì)蜱蟲(chóng)卵進(jìn)行基因編輯的麻煩之處：卵外部有硬殼;卵內(nèi)部滲透壓高，卵囊被觸碰時(shí)容易破裂;人類(lèi)還沒(méi)完全搞清楚它的胚胎生長(zhǎng)階段……將基因編輯材料注入到其它蟲(chóng)卵，自然也是個(gè)繁瑣復(fù)雜的任務(wù)。既然如此，干脆去更源頭處解決問(wèn)題——母體。科研人員直接在雌蟲(chóng)發(fā)育的卵細(xì)胞中引入了可遺傳的突變，讓它們生下一定概率的被基因編輯過(guò)的昆蟲(chóng)寶寶，效率更高，一步到位。不過(guò)，這種方法要大規(guī)模應(yīng)用，還需科研人員對(duì)各種昆蟲(chóng)的生命史更為了解。

(實(shí)習(xí)記者張佳欣)